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小鼠前心鈉肽ELISA試劑盒操作步驟

發布時間:2020-12-09   點擊次數:960次

小鼠前心鈉肽ELISA試劑盒操作步驟

 

樣本處理及要求

1.  血清:將收集于血清分離管的全血標本在室溫放置2小時或4℃過夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或將上清置于-20℃-80℃保存,但應避免反復凍融。
2.  血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標本,并將標本在采集后的30分鐘內于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃-80℃保存,但應避免反復凍融。
3.  組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會影響測量結果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mLPBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。*后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

4.  細胞培養物上清或其它生物標本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將上清置于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。

小鼠前心鈉肽ELISA試劑盒操作步驟

 

需要而未提供的試劑和器材

1. 酶標儀(450nm

2. 高精度加樣器及槍頭:0.5-10uL2-20uL20-200uL200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

4. 蒸餾水或去離子水

 

 

實驗結果計算

所測標準品的OD值為橫坐標,標準品的濃度值為縱坐標,在坐標紙上或用相關軟件繪制標準曲線,并得到直線回歸方程將樣品的OD值代入方程,計算出樣品濃度

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